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组织培养所用材料非常广泛

发布时间:2021-09-11 16:08:59点击:

组织培养所用的材料非常广泛

一、培养材料的采集

组织培养所用的材料非常广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,有时也利用花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。

 对于木本花卉来说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。

在快速繁殖中,最常用的培养材料是茎尖,通常切块在0.5厘米左右,如果为培养无病毒苗而采用的材料通常仅采取茎尖分生组织部分,其长度在0.1毫米以下。

二、培养材料的消毒

1、先将材料用流水冲洗干净,最后一遍用蒸馏水冲洗,再用无菌纱布或吸水纸将材料上的水分吸干,并用消毒刀片切成小块。

2、在无菌环境中将材料放入70%酒精中浸泡30-60秒。

3、再将材料移入漂白粉的饱和液或0.01%升汞水中消毒10分钟。

4、取出后用无菌水冲洗三、四次。

三、制备外植体

将已消毒的材料,用无菌刀、剪、镊等,在无菌的环境下剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等,叶片则不需剥皮。然后切成0.2-0.5厘米厚的小片,这就是外植体。在操作中严禁用手触动材料。

四、接种和培养

1、接种

在无菌环境下,将切好的外植体立即接在培养基上,每瓶接种4-10个。

2、封口

接种后,瓶、管用无菌药棉或盖封口,培养器用无菌胶带封口。

3、温度

培养基大多应保持在25°C左右,但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。

4、增殖

外植体的增殖是组培的关键阶段,在新梢等形成后为了扩大繁殖系数,需要继代培养。把材料分株或切段转入增殖培养基中,增殖培养基一般在分化培养基上加以改良,以利于增殖率的提高。增殖1个月左右后,可视情况进行再增殖。

5、根的诱导

继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,必须转到生根培养基上进行生根培养。1个月后即可获得健壮根系

五、组培苗的练苗移栽

试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境,必须进行练苗。一般移植前,先将培养容器打开,于室内自然光照下放3天,然后取出小苗,用自来水把根系上的营养基冲洗干净,再栽入已准备好的基质中,基质使用前最好消毒。移栽前要适当遮荫,加强水分管理,保持较高的空气湿度(相对湿度98%左右),但基质不宜过湿,以防烂苗。


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